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大鼠脑立体定位仪实验操作指导

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 先了解下某些颅外标记与颅内结构具有相对固定的位置关系。
1.前囟(bregma):位于冠状缝和矢状缝的交接处
2.人字缝尖(ambda):位于后囟人字缝与矢状缝交会点

仪器使用所需材料:
大鼠,立体定位仪,哺乳类手术器械,牙科钻,20%氨基甲酸乙酯,生理盐水,2%滂胺天蓝溶液
测试方法:
麻醉:20%氨基甲酸乙酯0.6 ml/100g, i.p.
固定:将大鼠头部固定于脑立体定位仪.上,门齿杆-3.3mm ;3个标准检测是否固定成功(鼻对正中,头部不动,提尾不掉);切头皮,剥开皮下组织,将骨缝暴露清晰,用铅笔在前囟和后囟各做一-标志.;核团定位,做标志,钻孔;LV(AP: -1.3 R 2.0 H: 3.5)mm
小心安 放微量注射器,针尖斜面中点进入孔内时,记高度。缓慢进针至LV ,注入10 μl 2%滂胺天蓝溶液(2 μl/min),留针10 min后缓慢拔针
确定注射位置:
取下动物,腹腔注射过量的20%氨基甲酸乙酯使动物死亡。
以咬骨钳咬开颅骨,小心取出大脑,顺着注射点将大脑切开,观察染料是否在侧脑室内

需要注意的是:
■立体定位仪为精密仪器,实验时应小心操.作,以免损坏
■微量注射器取出后应立即清洗,以防堵塞
 
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